notícia 1

Resolució de subunitats de trombina com l'enzim Agapurin del verí d'Agkistrodon halys i seqüenciació de residus d'aminoàcids

[Resum] Objectiu Determinar els 15 residus d'aminoàcids N-terminals de dues subunitats similars d'Agacutina.Les dues subunitats de la molècula enzimàtica s'han de dividir per obtenir la cadena peptídica única de la subunitat i seqüenciar-les.Mètodes L'agacutina altament purificada es va obtenir per mètode bioquímic.Es van preparar mostres de subunitats individuals per a la identificació i seqüenciació mitjançant la separació d'electroforesi SDS-PAGE, la recuperació de la cinta adhesiva de la subunitat i la tecnologia d'electrotransferència de membrana PVDF.Aquest últim va determinar 15 residus d'aminoàcids a l'extrem N de la subunitat mitjançant el mètode de degradació d'Edman.Resultats La seqüència de la subunitat gran (16 kDa) va ser DCSSGWSSYEEHQYY, i la de la subunitat petita (15 kDa) va ser DSSGWSSYEGHEYYV.Conclusió Els resultats de la seqüenciació van mostrar que Agacutin era un nou enzim semblant a la trombina del verí de serp cercant la base de dades NCBI.


Hora de publicació: 22-12-2022